Поглощение, анаболизм и удерживание в клетках 1843U89 и других бензохиназолиновых ингибиторов тимидилатсинтазы in vitro.

Поглощение, анаболизм и удерживание в клетках 1843U89 и других бензохиназолиновых ингибиторов тимидилатсинтазы in vitro. 1843U89 - мощный ингибитор (Ki = 0,09 нМ) тимидилатсинтазы (TS; EC 2.1.1.45), который проходит клинические испытания для лечения солидных опухолей. Хотя это отличный субстрат для фолат-анаболического фермента фолилполиглутаматсинтетазы (FPGS), 1843U89 отличается от других ингибиторов TS на основе фолиевой кислоты (например, CBC3717, D1694 и LY231514) тем, что исходное соединение является столь же мощным ингибитором фермента, как и его полиглутамированные аналоги. Как сообщалось (DS Duch et al., Cancer Res., 53: 810-818, 1993), 1843U89 в 10-80 раз более цитотоксичен, чем близкий структурный аналог 1031U89, который является эквипотенциальным ингибитором TS, но менее эффективным. подложка для ФПГС. Эта корреляция между эффективностью субстрата для FPGS и цитотоксичностью предполагает, что полиглутамация 1843U89 способствует его цитотоксичности. В текущем исследовании мы измерили внутриклеточные уровни полиглутамированных анаболитов 1031U89, 1843U89 и трех других бензохиназолиновых ингибиторов TS, а также анаболитов D1694 в клетках илеоцекальной карциномы HCT-8.

Каждый ингибитор TS был анаболизирован до полиглутамированных аналогов с добавлением от одного до пяти остатков глутамила после воздействия в течение 24 часов до концентраций IC90 (тех, которые ингибируют рост на 90% после 72 часов постоянного воздействия). D1694, который требует полиглутамации для сильного ингибирования ферментов, а также для цитотоксичности, был анаболизирован в основном до пента- и гексаглутаматов, тогда как примерно 80% внутриклеточного 1843U89 было аналогом диглутамата. Субстратная эффективность бензохиназолинов для FPGS позволяла прогнозировать степень внутриклеточного анаболизма. Диглутаматный аналог 1843U89 был лишь на 1/100 эффективнее субстрата для дальнейшей глутамации, чем сам 1843U89. Эффективный анаболизм по отношению к аналогу диглутамата и отсутствие зависимости от дальнейшего полиглутамата для ингибирования ферментов или цитотоксичности служат обоснованием сообщаемой чувствительности 1843U89 клеток с нарушенной активностью FPGS. В рамках исследования эффектов полиглутамации мы измерили удерживание внутриклеточных анаболитов 1843U89 и D1694 после 24 часов воздействия 20 нМ каждого соединения. Через 48 часов в среде без лекарств в клетках оставалось 7% внутриклеточного 1843U89 (в основном аналог диглутамата) и 36% D1694 (в основном пента- и гексаглутаматы). Поскольку длительное удержание (связанное с хранением полиглутаматов в тканях) может вносить вклад в клиническую токсичность, 1843U89 может проявлять меньшую долгосрочную токсичность, чем D1694.

PubMed ID: 8764125

Название журнала: Cancer research (ISSN: 0008-5472)

Список авторов: Hanlon M H, Ferone R

Молекулы в публикации: Ингибиторы ферментов; Антагонисты фолиевой кислоты; Индолы; Изоиндолы; Хиназолины; 1843U89; Полиглутаминовая кислота; Фолиевая кислота; Тимидилат-синтаза; Пептидные синтазы; фолилполиглутаматсинтетаза; Лейковорин;

Список тематик: Животные; Карцинома / метаболизм; Ингибиторы ферментов / метаболизм; Фолиевая кислота / метаболизм; Антагонисты фолиевой кислоты / метаболизм; Люди; Индолы / метаболизм; Новообразования кишечника / обмен веществ; Изоиндолы; Лейковорин / фармакология; Печень / энзимология; Скорость метаболического клиренса; Пептидные синтазы / метаболизм; Полиглутаминовая кислота / метаболизм; Хиназолины / метаболизм; Свинья; Тимидилатсинтаза / антагонисты и ингибиторы; Опухолевые клетки, культивированные;

Инструменты страницы